奥林巴斯显微镜:暗视野显微镜故障排除
有许多相关的常见问题与暗视野显微镜和显微摄影或数字成像。 这些范围从使用不正确的大小视场光阑足够的照明和聚光镜失准。 暗场照明问题都与台下聚光器,这应该是第一个问题,当事情不正常工作。 成像标本时使用这种技术,下面的问题和解决办法应作为一个指南。
问题: |
解决方案 :灯电压可设置得太低,或灯泡可能没有足够的强度,以适当地照亮试样。 最多约12伏的电压升高(为12伏,100瓦钨卤素灯泡)或更换光源,如果可能的话,与一个更大的强度。 如果不解决这个问题,检查台下聚光器,以确保其适当的大小与视场光阑的正确定位。 另外,检查的颜色和/或中性密度滤光片,偏光片,相位差板,或任何其他组件,可能减少照明强度的光路径。 |
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解决方案 :要么是不正确的位置台下聚光器或光站的物镜是错误的大小。 小心地机架物镜向上和向下,同时观察在视野标本。 进行检查,以一定的,两个聚光镜光圈和视场光阑被设置为敞开位置。 如果这并不影响照明,使它稍大或稍小的改变视场光阑的大小,然后重新检查照明。 |
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解决方案 :在过高的电压很长时间,这肯定会减少寿命的灯泡已使用。更换灯泡和灯电压降低后观察和/或试样的显微摄影。 |
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解决方案 :这个问题是典型时,台下聚光器错误地居中或视场光阑是太小了。 恢复到明视场,并重新建立的科勒照明条件,然后重复暗场过程中,确保聚光镜的中心。 如果这没有帮助,增加视场光阑的大小,直到适当的暗场条件成立。 |
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解决方案 :检查物镜转换器,以确保物镜被正确地定位在光轴的显微镜。 有一个定位的物镜是适当的位置时停止,将产生一个正的“啪嗒”。 如果不正确的中心视场光阑,也可能会出现的问题。 取下目镜,并把相望远镜的眼睛管(或使用伯特兰透镜),然后使用中心的螺丝以正确对齐视场光阑。 |
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解决方案 :暗视野显微镜的样本可能不适合。 许多染色标本不分散足够的光线暗场条件下可以清楚地成像。 试样的厚度,也可能是一个问题,因为非常薄的样品往往不成像以及从暗视野聚光镜发射与倾斜光线。 切换到明场,相衬,DIC,霍夫曼调制对比度,以确定这是否提高了标本的对比。 |
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解决方案 :这可能是由于灰尘,头发,纤维,和/或聚光镜上方某处的光学表面的脏物污染。 彻底清洁标本的光学级组织或棉花。 有时候,这个问题的产生是由于在物镜前透镜的污染。 小心地松开物镜,其所在地的消防水***,慢慢地打开,而通过目镜观察样品。 如果阻塞随着旋转的物镜,那么它可能是由于灰尘上的前透镜。 删除的物镜和滋润镜头前轻轻地呼气,然后再用镜头纸或棉签包裹的长木杆。 更换的物镜和检查,以一定的阻碍已被完全删除。 |
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解决方法 :这个问题通常发生在不透明的场站为物镜太小。 取出的目镜和查看的后焦平面上的一个光路中的样本的情况下,无论是用相位望远镜或伯特兰透镜的物镜。 整个背部焦平面应该是黑暗的,没有任何边缘明亮的光线出现在周围。 如果观察到的光的弧或圆中的物镜的后焦平面上,改变到一个稍大的视场光阑。 此外,降低视场光阑的大小,将有助于在抑制眩光和一个乌黑背景,(注意不要关闭虹膜光圈太多)。 |
问题: |
解决方案 :可调节的滑动可能太薄或聚光镜的太高。 测量厚度的显微镜幻灯片进行检查,以确定油接触不破。 如果遇到困难,保持底部的幻灯片油,请尝试使用较厚的幻灯片。 |
问题: |
解决方法 :这个问题经常发生在整个很厚的坐骑,或过多时,散射光污染工件的安装介质中捕获。 倒闭的视场光阑和旋转标本,以找到最好的方向,然后确定问题是否已得到纠正。 试样可以被重新安装在较薄的装载或安装介质,可能需要进行过滤。 用柔软的镜头纸或棉签小心地清洁整个的显微镜载玻片和盖玻片。 |
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解决方案 :对流电流正在创建在盖玻片的边缘由于缓慢蒸发。 放置的胎圈,凡士林或Cytoseal安装牢固地密封到显微镜载玻片上的周围介质的外周的盖玻片。 商业产品是可用的,可以被加入到水中,以减缓这些微小的生物体的运动,使得它们更容易拍摄。 |
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解决方案 :灯聚光镜可能被错误地聚焦或扩散过滤器可能会丢失,导致的图像出现在视野的灯丝。 重新聚焦在聚光镜和作出若干光路中的过滤器是一种扩散。 |
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解决方案 :小气泡可能被困在聚光镜的顶部和底部的显微镜载玻片之间的油。 取出的目镜(或插入伯川德透镜)观察的后焦平面上的物镜,其中的气泡将是可见的。 为了弥补,打破油接触,并用棉签除去残留的气泡。清洁聚光镜的前镜头与显微镜玻片上多余的油,然后申请一个干净的滴油的镜头。 如果问题仍然存在,彻底清洁所有的光学表面,然后再重新将油。 |
问题: |
解决方案 :聚光镜可能是偏离中心。 切换到低功耗的物镜和中心聚光镜。 仔细检查,以确定更高的功率物镜是否具有不同的中心,及若有,显微镜光轴中心的物镜。 |