荧光共振能量转移在蛋白质折叠研究

2020-09-04 09:35:16

“细胞在进行蛋白质折叠的时候会耍很多诡计。”伊利诺大学的研究员说。他们使用激光技术首次向众人展示了细胞在蛋白质折叠过程的速度及稳定性上的调控是极大的。
Gruebele 教授说,这些受细胞环境影响的反应过程可能与阿尔茨海默氏症,亨廷顿氏舞蹈症,疯牛病等相似,都是由于蛋白质的错误折叠或出现非正常的蛋白片段引起的。另一种可能,则与发烧时发生的一系列复杂的保护机制相关。

蛋白


如图中所示,黄色箭头所指右边为正确折叠的蛋白,黄色箭头所指左边是未折叠蛋白;蛋白中黄色的部分用红色荧光受体及绿色荧光供体进行标记,以研究距离及蛋白质状态。
在研究蛋白折叠过程是,他们使用蓝色LED或氩离子激光器激发供体,应用荧光共振能量转移原理,测得供体和受体之间的距离。
在显微镜下,这两种荧光信号分别被分为红色和绿色两个通道,被CCD收集。试验中,CCD的采集速度是一帧16.7毫秒,这是硬件的时间分辨率极限。研究者称,如果使用更快的相机,那么采集一帧图像的时间可降低到微秒级。
通过体内及体外实验对比,研究者发现者两种状况下的折叠速度是不一样的。这种差别可能是由于体内的状态比较拥挤,而试管环境中的蛋白折叠时没有压力。
研究者提到他们的*终目标是在细胞及化学水平上研究温度对细胞行为等的影响。



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